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          流式胞內染色步驟

          作者:聯科生物    發布日期:2018-11-12 09:30

           

           

          流式胞內染色步驟

          (使用FIX & PERM固定破膜)


          制備好細胞懸液,取100ul

          (全血樣本:人100ul,小鼠30~50ul)

          染表面抗體,室溫避光孵育15min,不用洗滌

          加入FIX&PERM Reagent A 100ul室溫孵育15min

          加入3ml流式染色緩沖液(Flow Cytometry Staining Buffer)

          300g 離心5min 棄上清收集細胞

          液體盡量倒干凈,不要殘留

          渦旋混勻沉淀,加入FIX&PERM Reagent B

          100ul和胞內抗體

          (同型對照管加入同等劑量的抗體)

          混勻,室溫避光孵育20min

          加入3ml流式染色緩沖液,300g離心5min棄上清收集細胞

          用0.5ml 流式染色緩沖液重懸后立即上機。

          或者加入0.5ml 0.1~4%多聚甲醛避光4℃保存24小時內上機分析


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